外周血单核细胞(Peripheral blood monoculear cell, PBMC), 包括淋巴细胞(T细胞,B细胞和自然杀伤(NK)细胞)和单核细胞。而红细胞和血小板没有细胞核,而粒细胞(granulocytes) 包括中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞,有多叶核,所以不包括在PBMC中。
人类的PBMC主要由淋巴细胞组成,之后是单核细胞以及一小部分的树突状细胞(dendritic cells, DC).
PBMC的提取方法: 利用Ficoll将全血分层,之后进行梯度离心, 血液就会分离成一层血浆,然后是一层PBMCs和一层多形核细胞(polymorphonuclear ),如中性粒细胞和嗜酸性粒细胞,和底层红细胞。通过溶解红细胞可以进一步分离多形核细胞。嗜碱性粒细胞有时出现在密度较高的组分中和PBMC组分中。
注: Ficoll: 一种亲水性多糖(hydrophillic polysaccharide )
PBMC的细胞发育过程
PBMC起源于位于骨髓(bone marrow)的造血干细胞( hematopoietic stem cells, HSCs)。在造血干细胞的造血过程中,它们会产生髓系细胞(单核细胞、巨噬细胞、粒细胞、巨核细胞、树突状细胞、红细胞)和淋巴系细胞(T细胞、B细胞、NK细胞)。
图解:
- Haematopoietic stem cell: 造血干细胞
- common myeloid progenitor: 髓系祖细胞
- common lymphoid progenitor: 淋巴祖细胞
- myeloblast: 成髓细胞, 骨髓母细胞
- Lymphoblast: 成淋巴细胞, 淋巴母细胞
- lymphocytes: 淋巴细胞
- erythrocytes: 红细胞
- plateletes: 血小板
- basophils: 嗜碱性粒细胞
- neutrophils: 中性粒细胞
- eosinophils: 嗜酸性粒细胞
- monocytes: 单核细胞
人类PBMC的不同细胞类型的比例
PBMC中大部分都是淋巴细胞,包括B细胞和T细胞,其中CD3+ T细胞又占了淋巴细胞中绝大部分(45-70%)。这些T细胞都处于初始(naive)状态,即已经成熟了但没有受到抗原刺激。 在正常人中,只有非常小的一部分初始T细胞会因抗原识别而被激活。同样的B细胞也都处于初始状态。
相对于淋巴细胞,单核细胞的比例在10-30%,收到刺激之后会发育成树突状细胞(DC)或巨噬细胞。
干细胞的比例非常低,只有0.1-0.2%,因此很难从全血样本中分离到。分子标记是CD34+。
参考资料
https://en.wikipedia.org/wiki/Peripheral_blood_mononuclear_cell
https://www.stemexpress.com/blogs/peripheral-blood-mononuclear-cells/